Что такое криоконсервация эмбрионов и зачем она нужна?

Криоконсервация эмбрионов

В большинстве циклов ВРТ проводится стимуляция суперовуляции для созревания большого количества яйцеклеток, поэтому, как правило, имеется и большое количество эмбрионов. Поскольку обычно в полость матки переносят не более трех эмбрионов, у многих пациентов после переноса остаются «лишние» эмбрионы.

Эти «лишние» эмбрионы можно криоконсервировать (заморозить) и длительное время хранить в жидком азоте при -196ºС. Впоследствии их можно разморозить и использовать для этой же пациентки, если в цикле ЭКО беременность не наступит, или если после рождения ребенка она захочет иметь еще детей. Таким образом, она может вновь пройти через цикл переноса эмбрионов, не подвергаясь при этом стимуляции суперовуляции и пункции яичников.

Криоконсервация эмбрионов является одним из хорошо отработанных методов вспомогательных репродуктивных технологий. Первый ребенок после переноса размороженного эмбриона родился в 1984 году. Большинство клиник ЭКО практикуют криоконсервацию оставшихся после цикла ЭКО эмбрионов для последующего переноса в матку.

Шансы на наступления беременности после переноса размороженных эмбрионов ниже, чем при переносе свежих эмбрионов. Однако репродуктологи настоятельно советуюм всем своим пациентам, у которых остались «лишние» эмбрионы, осуществлять их криоконсервацию. Цикл криоконсервации и переноса размороженных эмбрионов значительно дешевле, чем проведение нового цикла ЭКО, и наличие замороженных эмбрионов является для пациентов своего рода «страховкой» на тот случай, если беременность не наступит. Однако, поскольку имеет смысл замораживать только эмбрионы хорошего качества, криоконсервация – это «бонус», который получают только около 50% пациентов ЭКО.

Примерно половина эмбрионов хорошего качества благополучно переносит цикл заморозки-разморозки. Риск развития врожденных патологий плода не увеличивается при криоконсервации эмбрионов.

Преимущества криоконсервации эмбрионов

• Позволяет максимизировать шансы на наступление беременности после ЭКО и предотвратить гибель нормальных жизнеспособных эмбрионов, оставшихся после цикла ЭКО. Это самое важное преимущество криоконсервации. Около 50% пациенток могут иметь дополнительные эмбрионы для криоконсервации. Результативность переноса размороженных эмбрионов постоянно растет, приближаясь к результативности «свежих» циклов ЭКО.
• Криоконсервация всех эмбрионов для будущего переноса в матку может быть рекомендована женщинам, имеющим повышенный риск развития синдрома гиперстимуляции яичников тяжелой степени после проведения индукции свуперовуляции в цикле ЭКО.
• ЭКО криоконсервация эмбрионов рекомендуется в тех случаях, когда вероятность имплантации эмбриона снижена, например при наличии полипа эндометрия, недостаточной толщине эндометрия к моменту переноса эмбриона, дисфункциональном кровотечении в данный период или болезни.
• При трудностях с переносом эмбрионов в цикле ЭКО, например стенозе цервикального канала (невозможность пройти через цервикальный канал из-за сужения канала, наличия в нем рубцов и т.д.).
• Замораживание эмбрионов при ЭКО может быть включена в цикл донации яйцеклеток, если по каким-то причинам сложно провести синхронизацию менструальных циклов донора и реципиента. Кроме того, в некоторых странах обязательной является криоконсервация всех эмбрионов, полученных из донорских яйцеклеток, и их карантин в течение шести месяцев до момента получения повторных отрицательных результатов анализов донора на ВИЧ, сифилис, гепатиты В и С.
• После проведения цикла ЭКО, закончившегося рождением ребенка, и если супруги не хотят больше иметь детей, замороженные эмбрионы могут быть переданы для донации другой бесплодной паре.
• Перед проведением химиотерапии или радиотерапии по поводу рака.

Как проходит замораживание и размораживание эмбрионов?

Эмбрионы могут быть заморожены на любой стадии (пронуклеусы, дробящийся эмбрион, бластоциста), если они достаточно хорошего качества, чтобы перенести цикл заморозки-оттаивания. Эмбрионы хранят по одному или группами из нескольких эмбрионов, в зависимости от того, какое количество эмбрионов планируют впоследствии перенести в матку.

Эмбрионы смешивают с криопротектором (специальной средой, защищающей их от повреждений в ходе замораживания). Затем их помещают в пластиковую соломинку и охлаждают до очень низкой температуры с помощью специального программного замораживателя или методом сверхбыстрого замораживания (витрификации). Эмбрионы хранят в жидком азоте при температуре -196ºС.

При разморозке эмбрионы извлекают из жидкого азота, оттаивают при комнатной температуре, удаляют криопротектор и помещают эмбрионы в специальную среду.

Если эмбрионы были заморожены на стадии дробящегося эмбриона или бластоцисты, они могут быть разморожены и перенесены в матку в тот же день. Однако, если они были заморожены на стадии двух пронуклеусов, то их размораживают за сутки до переноса, культивируют в течение суток, чтобы оценить их дробление, и переносят в матку на стадии 2-4 клеточного эмбриона.

Как долго можно хранить замороженные эмбрионы?

Замороженные эмбрионы могут храниться, сколько потребуется – даже несколько десятков лет. Когда они хранятся в жидком азоте, при температуре -196ºС, вся метаболическая активность клеток при такой низкой температуре останавливается.

Какой процент выживания эмбрионов после замораживания и оттаивания?

Не все эмбрионы хорошо переносят процесс замораживания и оттаивания. В клинике с хорошо отлаженной программой криоконсервации процент выживания эмбрионов составляет 75-80%. Повреждение эмбрионов происходит как следствие криоконсервации, но не в период хранения эмбрионов, а в ходе их замораживания и оттаивания. Поэтому может потребоваться разморозить несколько эмбрионов, чтобы получить два-три эмбриона хорошего качества для переноса в матку.

Криоконсервация эмбрионов

Что это такое?

Глубокая заморозка эмбрионов в жидком азоте.

Зачем она нужна?

Супружеские пары, обращающиеся сегодня в российские центры экстракорпорального оплодотворения, все чаще задают врачам вопросы не только об эффективности самого метода ЭКО, но и о том, насколько успешно работают в данном центре программы замораживания или, если использовать научную терминологию, криоконсервации эмбрионов и яйцеклеток человека. И это далеко не праздные вопросы, поскольку именно криоконсервация оставшихся после переноса эмбрионов позволяет продолжить лечение бесплодной пары в том случае, если беременность в стимулированном цикле не наступила. Эти эмбрионы могут быть разморожены и перенесены в матку пациентки в последующих циклах, и для этого уже не потребуется использование дорогостоящих и не всегда безопасных для здоровья гормональных препаратов.

Когда стоит подумать о криоконсервации?

Если в цикле программы ЭКО получено более 4 эмбрионов, то те эмбрионы, которые не были перенесены в полость матки могут быть заморожены при помощи одного из методов криоконсервации.

В цикле в котором используются замороженные эмбрионы, пациентка также получает лечение по определенной схеме, включающей применение эстрогенов и прогестерона, но уже без гонадотропинов, направленное на достижение должного развития эндометрия на момент переноса эмбрионов. После переноса эмбрионов продолжается введение эстрогенов и прогестерона вплоть до 7-8 недели беременности.

Насколько это проверенный и эффективный метод?

Отдельные попытки сохранения в замороженном состоянии яйцеклеток и сперматозоидов животных предпринимались еще 200 лет назад. Но только с 1949 года, когда Польдж с коллегами открыли защитные свойства глицерина, криоконсервация спермы стала реальностью. Яйцеклетки, эмбрионы и ткань яичников сохранить длительное время не удавалось. Лишь с введением других реагентов (ДМСО и пропандиол), гораздо позже, наконец удалось удачно провести замораживание и размораживание сначала эмбрионов (Вайтенгем в 1972 году), а затем и зрелых ооцитов (Фрайдлер в 1988 году) млекопитающих.

Первая беременность из замороженного и размороженного эмбриона человека была получена в 1983 году (Троунсон и Мор).

К 2000 году наиболее распространенным подходом к криоконсервации эмбрионов оказался метод замораживания эмбриона на стадии зиготы. В этом случае выживаемость эмбрионов имеет наиболее высокие показатели и достигает 60-80%. Частота имплантации эмбрионов достигает тех же значений, что и у свежих эмбрионов — 10-15%.

Во многих странах используется также криоконсервация эмбрионов на стадии дробления. В зависимости от качества эмбрионов после оттаивания в этом случае выживают около 30-80 % эмбрионов.

Какова вероятность наступления беременности?

После размораживания выживает лишь около половины замороженных эмбрионов. Вероятность инициации беременности от жизнеспособного замороженного эмбриона почти равняется вероятности инициации беременности от незамороженного эмбриона.

Знакомьтесь — реальная история Ангелики (Израиль).

Крио-протокол, что это такое?

На сегодняшний день существует 3 способа проведения крио протокола:

1. Подсадка размороженных эмбрионов в естественном цикле

Плюсы: Максимально щадящий для организма.
Минусы: Проводится только в овуляторном цикле. Требует тщательного УЗИ контроля. Относительно низкая результативность.

2. Подсадка в стимулированном цикле

Плюсы: Не зависит от собственной овуляции. Чуть более высокая результатавность по сравнению с подсадкой в естественном цикле
Минусы: Сопровождается приемом гормональных препаратов.

3. Подсадка в стимулированном цикле с блокадой гипофиза
У каждого из этих способов есть свои плюсы и минусы.

Плюсы: Не зависит от собственной овуляции. Считается самым результативным.
Минусы: Самый дорогостоящий. Наиболее медикаментозно нагруженный.

Примечание: Оценка результативности разных способов ОЧЕНЬ условная.

Какова вероятность врожденных дефектов у крио-малышей?

Определенную обеспокоенность вызывает неизвестный риск появления врожденных дефектов у детей рожденных после заморозки / оттаивания эмбрионов.

В практике животноводства широкомасштабное использование криоконсервации не показало увеличения частоты врожденных дефектов.

Количество детей рожденных после криоконсервации эмбрионов человека достаточно мало, но к настоящему времени не выявлено повышения частоты врожденных дефектов.

Проблемы, связанные с криоконсервацией

Замораживание эмбрионов человека порождает массу юридических, этических и моральных проблем, с которыми сталкиваются клиники ЭКО за рубежом и которые в скором времени могут возникнуть у российских центров репродукции. Эмбрион человека – это зародыш, в отношении которого в мире сегодня не существует четко прописанного законодательства.

При разводе супружеской пары или в случае гибели одного из генетических родителей, имеющих замороженные эмбрионы, могут возникнуть достаточно серьезные юридические проблемы – в настоящее время не существует законов, определяющих права этих эмбрионов.

Читать еще:  Радикальная диета

В некоторых странах запрещена криоконсервация эмбрионов и разрешается только инсеминация небольшого количества яйцеклеток (ооцитов) для обеспечения гарантированного переноса эмбрионов в цикле стимуляции.

Масса моральных и этических проблем возникает в тех случаях, когда законом не регулируется продолжительность обязательного хранения замороженных эмбрионов.

Но даже в тех странах, где специальными правовыми комитетами этот срок ограничен тремя-пятью годами, неизбежно возникают вопросы: как должна поступить клиника по истечении этого времени, если эмбрионы не востребованы их генетическими родителями? Без соответствующего разрешения их нельзя уничтожить, нельзя использовать в научных или клинических (для другой бесплодной супружеской пары) целях.

Криобанки клиник ЭКО в мире насчитывают сотни тысяч невостребованных или «забытых» своими мамами и папами эмбрионов, ожидающих своей участи.

Перспективы развития этого метода.

Все более активно проводится поиск адекватных программ криоконсервации яйцеклеток человека. Одним из таких многообещающих методов является витрификация. Она позволяет избежать морально-этических и религиозных проблем, т.к. яйцеклетки так же как и сперматозоиды являются половыми клетками (гаметами), и никакие юридические, правовые и религиозные запреты на их криоконсервацию и хранение не распространяются.

Вот почему такое пристальное внимание многочисленные средства массовой информации Великобритании в октябре 2002 года уделили сообщению о рождении первого в этой стране ребенка у женщины, чьи яйцеклетки были заморожены, а затем оттаяны непосредственно перед оплодотворением.Девочке, Эмили Перри, на момент написания этой уже исполнилось полгода.

Ее родители, Хелен и Ли Перри, были женаты 17 лет и обратились в клинику экстракорпорального оплодотворения из-за непроходимости маточных труб супруги. После гормональной стимуляции яичников лишь 2 яйцеклетки были оплодотворены и 2 эмбриона были перенесены 36-летней Хелен. По религиозным убеждениям (Перри являются Свидетелями Йеговы) супруги не хотели иметь лишние эмбрионы, которые могут не потребоваться в дальнейшем. Поэтому все остальные яйцеклетки были заморожены с использованием нового метода криоконсервации. Беременность не наступила. Но через два месяца 5 яйцеклеток миссис Перри были разморожены и оплодотворены. Вторая попытка оказалась успешной и завершилась рождением Эмили.

Эмили стала вторым ребенком в Великобритании, рожденным из замороженных яйцеклеток. Но первый такой ребенок родился после криоконсервации, оттаивания и оплодотворения донорских яйцеклеток, а Эмили — из размороженной яйцеклетки своей родной, «генетической», матери.

Метод витрификации ооцитов, благодаря которому Эмили появилась на свет, активно разрабатывается австралийскими и итальянскими учеными.

В 1999 году в Австралии у 47-летней мамы родилась первая в мире девочка после витрификации донорских ооцитов. Но до сих пор это единичные в мире беременности и новорожденные, и пока рано говорить о широком практическом использовании этого метода.

Нельзя забывать и о необходимости дальнейшего проведения экспериментальных исследований, чтобы уточнить, как влияет быстрое замораживания на ультраструктуры клетки, насколько это безопасно для будущего эмбриона.

Подготовила Ната* по материалам статей .Хилькевич Л.В.

Крио
(греч. kryos — холод, мороз, лед)
первая составная часть сложных слов, обозначающая : связанный со льдом, с низкими температурами, например, криоскопия, криосфера, криотерапия и т.п.

Криоконсервация в репродуктологии: зачем нужна заморозка яйцеклеток, спермы, эмбрионов и сколько стоит процедура?

Современная репродуктология использует все новейшие разработки, чтобы дать возможность людям, ранее считавшимся бесплодными, выносить и родить собственного ребенка. Одним из таких способов является криоконсервация. Именно с ее помощью можно повысить шансы на приживаемость эмбриона в программе ЭКО или сохранить для женщины возможность стать матерью в любом возрасте. Наша статья расскажет о том, как проводят криоконсервацию, кому она показана и где ее можно сделать.

Криоконсервация как способ заморозить время

Что же такое криоконсервация и зачем она нужна? Суть технологии заключается в глубоком замораживании клеток и тканей в жидком азоте при температуре -196°C с возможностью последующей разморозки и использования. Все биологические процессы в клетках останавливаются, жизненный цикл замирает, и это дает возможность длительного хранения материала до того момента, когда он будет востребован.

Заморозка может проводиться двумя способами: первый — это медленная дегидратация клетки, то есть постепенное удаление из нее жидкости с заменой на криопротектор. Второй способ, называемый витрификацией, — это практически мгновенное замораживание без процесса кристаллизации. Каждый из этих способов находит свое применение в зависимости от биологической характеристики ткани или клетки.

В медицине криоконсервация чаще всего применяется при проведении процедуры экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в целях сохранения избыточных эмбрионов для последующей их подсадки. Кроме того, метод используют по ряду показаний для сохранения фертильной спермы или яйцеклеток.

Основной задачей криоконсервации в репродуктологии является увеличение шансов наступления беременности у женщин, которые по тем или иным причинам не могут забеременеть традиционным способом. Современная репродуктология предлагает использовать криоконсервацию не только по медицинским, но и по социальным показаниям. Многие современные женщины до 40 лет не готовы обзаводиться детьми, предпочитая сначала обеспечить материальную базу для будущего ребенка. При этом они забывают о том, что женский организм после 30 лет снижает способность к воспроизводству. Криоконсервация фертильных яйцеклеток на пике детородного возраста (от 18 до 28 лет) позволит женщине позже выносить собственного ребенка практически без риска выкидыша. При этом сама процедура изъятия и замораживания клеток становится более доступной и по цене, и по количеству клиник, в которых она проводится.

На заметку

Процедура криоконсервации регулируется приказом Министерства здравоохранения РФ от 30 августа 2012 года № 107н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению» (далее — Приказ № 107н). В нем подробно изложено, кто имеет право на получение медицинской помощи с применением вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), каковы этапы оказания помощи и порядок применения ВРТ. В статьях 40–53 Приказа № 107н регламентируется непосредственно процесс криоконсервации, включая забор тканей и их хранение.

Криоконсервация эмбрионов

Процедура ЭКО часто сопровождается получением большого числа оплодотворенных эмбрионов, из которых пациентке подсаживают только часть. При этом нельзя гарантировать успешность первой попытки. Для того чтобы иметь возможность проведения еще одной подсадки, эмбрионы рекомендуется заморозить и сохранить. Кроме того, их можно будет использовать в том случае, если пара в будущем захочет иметь еще одного ребенка. Встречаются случаи, когда некоторые пары считают эмбрионы полноценными людьми, в силу чего их заморозка и уничтожение представляется неприемлемым по религиозным и этическим соображениям.

Специалисты также советуют произвести криоконсервацию эмбрионов в случаях:

• участия женщины в программе суррогатного материнства;
• возникновения у женщины в цикле ЭКО любого патологического состояния (например, вирусного заболевания или экстренной операции), снижающего шансы на зачатие.

Процедура криоконсервации эмбрионов состоит из нескольких этапов.

1. Из оставшихся после подсадки эмбрионов выбирают наиболее качественные и здоровые на определенной стадии развития. Обычно замораживают эмбрионы в стадии зиготы (с 2, 4 или 8 клетками) или бластоцисты.
2. Перед заморозкой из эмбриона удаляют воду, поскольку она способна формировать кристаллы льда, разрывающие клетки изнутри, и образовывать вредные для эмбриона соли. Эмбрион помещают сначала в специальный буферный раствор, а через 5–10 минут переносят его в проникающий криопротектор. В результате процесса дегидратации эмбрион сначала быстро сжимается, а когда криопротектор замещает воду — расширяется вновь. По окончании этой процедуры он готов к заморозке.
3. Эмбрионы помещаются в специальные полимерные или стеклянные трубочки, которые предварительно охлаждают, и укладывают в канистры. В каждой трубочке находится от одного до 4 эмбрионов, с учетом того, сколько их планируется разморозить и подсадить в будущем.
4. Канистры опускают в танки с жидким азотом — так называемые сосуды Дьюара. Температура в хранилищах достигает -196°С.

Срок хранения эмбрионов практически не ограничен. Известны случаи успешной подсадки и развития плода после 10 лет криоконсервации.

Криоконсервация яйцеклеток

Еще одним способом сохранения женской фертильности является криоконсервация яйцеклеток (ооцитов). Показаниями к ее проведению могут быть факторы как медицинского, так социального свойства. В их числе:

• Сохранение жизнеспособных яйцеклеток у онкобольных женщин до проведения химиотерапии или лучевой терапии, отрицательно влияющих на способность к деторождению.
• Наличие у пациентки эндометриоза, вызывающего дисфункцию яичников.
• Перспектива использования яйцеклетки в процедурах ЭКО.
• Отложенная беременность. Женщина желает родить ребенка только после определенных достижений в карьерной сфере.
• Возможность оплодотворения спермой донора. Актуально для тех случаев, когда незамужняя женщина решает стать матерью.

Процесс хранения яйцеклеток в замороженном виде не оказывает отрицательного влияния на их жизнеспособность. Повреждение может произойти только на этапе заморозки или оттаивания. При быстрой заморозке, так называемой витрификации, процент выживаемости эмбрионов достигает 98, тогда как при медленной — только около 50.

Проведение процедуры криоконсервации также включает в себя несколько этапов:

1. Обследование женщины у специалиста.
2. Стимуляция овуляции с помощью гормональных средств для того, чтобы получить максимальное количество фолликулов с яйцеклетками.
3. Пункция фолликулов и получение яйцеклеток. Забор производится в операционной с помощью специальной иглы под местным или общим наркозом.
4. Заморозка яйцеклеток методом витрификации. В этом случае он является единственно возможным, поскольку позволяет избежать повреждений в процессе заморозки и разморозки.
5. Помещение яйцеклеток в пластиковые трубочки и в сосуды Дьюара для хранения. В каждой трубочке находится до 5 яйцеклеток.

Читать еще:  Чем полезно масло какао

Хранение биоматериала может продолжаться по желанию пациентки от нескольких месяцев до нескольких десятков лет. На качество яйцеклеток срок хранения не оказывает влияния. Обычно врачи рекомендуют замораживать яйцеклетку сроком на 5–7 лет.

Криоконсервация спермы

Криоконсервация спермы проводится практически в любом репродуктивном центре. Показаниями к этой процедуре могут стать следующие факторы:

1. Участие в программе ЭКО, когда сперма мужа или донора необходима для оплодотворения яйцеклеток перед подсадкой.
2. При олигоспермии (недостаточном количестве сперматозоидов) и астенозооспермии (их малой подвижности). В этом случае сперма сдается несколько раз с перерывами и заморозкой для накопления необходимого количества активных сперматозоидов.
3. Предстоящее лечение онкологического заболевания, включающее химиотерапию и радиотерапию. Как показывают исследования, эти виды лечения резко снижают выработку сперматозоидов и их качество. У 20% мужчин после приема химиопрепаратов возникает временное или даже стойкое бесплодие.
4. Профессиональные занятия спортом или травматичные виды деятельности. Они могут привести к повреждению яичек и, как следствие, к бесплодию.
5. Хирургические операции на половых органах мужчины, такие как вазэктомия, существенно снижающие количество и качество вырабатываемой спермы.
6. Повреждение спинного мозга, так как в этом случае способность к эякуляции снижается у 95% пациентов.

Криоконсервация сперматозоидов является надежной защитой от передачи различных заболеваний в их непроявленной стадии.

Замораживание спермы включает в себя обследование, подготовку и саму криоконсервацию:

1. В перечень обследования входят:
   • мазок на инфекции,
   • анализы на ВИЧ, сифилис и вирусные гепатиты,
   • спермограмма,
   • криотест,
   • тест на способность к оплодотворению и на наличие антител к вирусу герпеса.
2. Подготовка материала:
   • помещение пробы в инкубатор для разжижения на 30–35 минут;
   • центрифугирование для получения фракции подвижных сперматозоидов;
   • отмывание и выдерживание с криопротектором при комнатной температуре в течение 10 минут;
   • помещение подготовленных сперматозоидов в трубочки и запечатывание.
3. Замораживание материала:
   • охлаждение до температуры 4°С в специальной установке;
   • замораживание в течение 2 часов в жидком азоте;
   • помещение трубочек в сосуд Дьюара для последующего хранения.

Замороженная сперма может храниться достаточно долго, но точный период сохранения жизнеспособности сперматозоидов еще не выяснен. Самый долгий срок криоконсервации сперматозоидов, использование которых при оплодотворении привело к здоровой беременности, составляет на сегодняшний день 21 год.

Правила хранения биоматериала в замороженном виде

Организация криохранилища, или криобанка, должна соответствовать определенным требованиям, поскольку при хранении биоматериала используется жидкий азот. Эти требования регламентируются СТО 002 099 64.01-2006 «Правила по проектированию производств продуктов разделения воздуха»:

1. Под установку криохранилищ отводится отдельное помещение в капитальном здании.
2. Площадь помещения должна обеспечивать беспрепятственное обслуживание каждого из хранилищ. Между ними должны оставаться проходы, удобные для загрузки или выгрузки материалов, а также провоза транспортных сосудов Дьюара.
3. Перекрытия пола должны выдерживать общую массу оборудования и активную нагрузку рабочего персонала помещения.
4. Пол должен быть покрыт твердыми непористыми и непылеобразующими материалами. Эти материалы должны выдерживать перепады температур до 200°С.
5. В помещении запрещено размещение постоянных рабочих мест сотрудников и присутствие постороннего оборудования.
6. В помещении должна иметься вытяжная вентиляция принудительного типа. Желательна установка пылевых фильтров и систем регуляции влажности.
7. Запрещается наличие водосодержащего оборудования, а также водопроводных кранов и труб.
8. Все сигнальные датчики должны быть вынесены в места постоянного нахождения персонала.

Условия хранения. В криобанке все биологические материалы хранятся в специальных емкостях, предварительно упакованные в трубки или пробирки. Этот способ хранения позволяет размораживать пробирки по одной, используя только необходимое количество материала. Все пробирки снабжаются метками с указанием данных пациента и помещаются в жидкий азот, где хранятся в течение необходимого времени при постоянных низких температурах.

Организации, имеющие право оказывать подобные услуги. В соответствии со статьей 41 Приказа № 107н предоставлять услуги по криоконсервации и хранению эмбрионов и половых клеток имеют право медицинские организации, оказывающие специализированную, в том числе высокотехнологичную медицинскую помощь. Они должны быть оборудованы криохранилищами и иметь лицензию на осуществление медицинской деятельности, предусматривающей оказание услуг такого типа. Наличие лицензии предписывается постановлением Правительства РФ № 292 от 16 апреля 2012 года «О лицензировании медицинской деятельности».

Выбор криобанка обычно зависит от выбора клиники репродуктологии, в которой предполагается проводить процедуру. Практически все медицинские центры такого профиля оборудованы собственными хранилищами.

Сколько стоит криоконсервация?

Стоимость криоконсервации складывается из нескольких факторов:

• Продолжительность хранения. Как правило, клиники выставляют цену за месяц хранения. Также существуют специальные комплексные программы, включающие в себя длительное нахождение биоматериала в криобанке.
• Количество замораживаемых и хранимых единиц. Чем больше яйцеклеток или эмбрионов подвергается криоконсервации и хранится в клинике, тем выше стоимость. Обычно цена указывается за 1–4 единицы, каждая последующая единица оплачивается дополнительно.
• Метод заморозки. Витрификация стоит несколько дороже, поскольку это более сложный и эффективный способ замораживания яйцеклеток и эмбрионов.
• Место расположения клиники. Чем ближе к центру, тем выше может оказаться цена на процедуры.
• Известность клиники. В «брендовых» учреждениях стоимость криоконсервации спермы, яйцеклеток и эмбрионов иногда в разы дороже, чем в малоизвестных репродуктивных центрах.

Средние цены на криоконсервацию в Москве приведены в таблице 1.

Таблица 1. Цены на криоконсервацию и хранение различного типа биоматериала

Биоматериал

Средняя стоимость криоконсервации, руб.

Как происходит криоконсервация ооцитов и эмбрионов

Вспомогательные репродуктивные технологии дарят радость рождения ребенка огромному количеству людей. Неотъемлемой их частью является криоконсервация эмбрионов и ооцитов – процесс сохранения эмбрионов и яйцеклеток при низкой температуре.

Быстрое развитие современных технологий репродуктивной медицины постоянно улучшает эффективность и безопасность криоконсервации, которая используется для сохранения сперматозоидов с 1953 года. О первой беременности, которой удалось достичь с использованием этой технологии, было сообщено в 1983 году.

Что такое криоконсервация ооцитов?

Криоконсервация ооцитов – это процесс, во время которого женские яйцеклетки (ооциты) экстрагируют из организма, замораживают и сохраняют. Спустя некоторое время, когда женщина хочет забеременеть, ооциты размораживают, оплодотворяют и переносят полученные эмбрионы в матку.

Что такое криоконсервация эмбрионов?

Это процесс сохранения эмбрионов при низкой температуре в стадии эмбриогенеза, которая соответствует предимплантационному этапу. Позже эти эмбрионы размораживают и используют для имплантации в матку. Криоконсервация – очень важная часть большинства программ по экстракорпоральному оплодотворению.

Криоконсервация ооцитов чаще всего применяется у трех групп женщин:

• Больные раком, которым еще не начинали проводить химиотерапию или лучевую терапию. Эти методы лечения онкологических заболеваний вредят фертильности женщин.
• Женщины, использующие экстракорпоральное оплодотворение, которые отказываются от криоконсервации эмбрионов по религиозным или этическим причинам.
• Женщины, которые хотят сохранить молодые яйцеклетки для использования в будущем.

Криоконсервация эмбрионов проводится в следующих случаях:

• Для сохранения дополнительных эмбрионов, полученных во время экстракорпорального оплодотворения.
• Для предоставления дополнительных шансов забеременеть, если первое экстракорпоральное оплодотворение не удалось.
• Женщина может сохранить эмбрионы до того, как начать лечение рака, которое ухудшает ее фертильность.
• Эмбрионы могут быть сохранены и переданы другим женщинам в рамках программы донорства.
• Эмбрионы могут быть сохранены и переданы для научных исследований.

Плюсы и минусы

Криоконсервация эмбрионов и ооцитов является неотъемлемой частью вспомогательных репродуктивных технологий и имеет свои плюсы и минусы. Применение этих технологий позволяет испытать радость рождения ребенка огромному количеству людей по всему миру.

Научные исследования утверждают, что замораживание и размораживание ооцитов и эмбрионов не вредит будущему ребенку. У детей не наблюдается увеличения количества врожденных дефектов или других проблем со здоровьем. Подробнее об особенностях детей, рожденных в результате ЭКО →

К сожалению, ооциты и эмбрионы могут быть повреждены в результате процессов замораживания и размораживания, а также вследствие технических или человеческих ошибок. В учреждениях, занимающихся криоконсервацией, постоянно внедряются меры, направленные на минимизацию этих рисков.

Любые клетки, включая ооциты и эмбрионы, во время замораживания подвергаются различным действиям. Перед замораживанием их помещают в растворы потенциально токсических веществ-криопротекторов. Во время замораживания клетки должны выдержать образование льда, резкие изменения температуры, концентрации электролитов и рН. После таких нефизиологических изменений неудивительно, что некоторые ооциты и эмбрионы не выдерживают криоконсервацию.

Кроме этого, криоконсервация сопровождается следующими рисками:

• Осложнения, связанные с применением лекарственных средств, которые вызывают выделение многих яйцеклеток из яичников женщины. У некоторых пациенток развивается синдром гиперстимуляции яичников, при котором они увеличиваются в размерах, возникают боль в животе, вздутие кишечника, тошнота, рвота и диарея.
• Осложнения, связанные с процедурой извлечения яйцеклеток. Изредка использование аспирационной иглы для извлечения ооцитов может стать причиной кровотечения, инфицирования, повреждения кишечника, мочевого пузыря или кровеносных сосудов.
• Эмоциональные риски. Вспомогательные репродуктивные технологии дают надежду на рождение ребенка, однако не гарантируют этого.

Как осуществляется криоконсервация?

Перед процедурой криоконсервации необходимо получить ооциты или эмбрионы. Для этого проводится медикаментозная стимуляция выделения большого количества яйцеклеток из яичников и их извлечение из организма.

Если замораживают эмбрионы, перед криоконсервацией проводится экстракорпоральное оплодотворение яйцеклеток.

Для защиты ооцитов и эмбрионов от криоповреждения перед замораживанием их помещают в специальные растворы, содержащие криопротекторные вещества. Существует 2 вида криопротекторов – проникающие внутрь клетки (например, пропандиол) и внеклеточные (например, сахароза). Они снижают температуру замерзания и предотвращают образование льда внутри клеток, а также защищают клетки, взаимодействуя с их оболочкам во время замерзания.

Читать еще:  Американская диета в двух вариантах

Существует два основных метода криоконсервации:

• Медленное программируемое замораживание – это разработанные в начале 1970-х годов методики, которые замораживают ооциты и эмбрионы с регулируемой скоростью. После достижения определенной температуры они помещаются в жидкий азот. Скорость снижения температуры составляет примерно 1°C в минуту.
• Витрификация – более новая методика криоконсервации, которая характеризуется формированием стеклоподобной субстанции и отсутствием повреждения клеток от образования кристаллов льда. При ее применении к замораживаемым ооцитам или эмбрионам добавляют криопротекторы, снижающие температуру замерзания и повышающие вязкость. Замораживание ооцитов и эмбрионов при витрификации происходит намного быстрее.

Как происходит процесс размораживания эмбрионов?

Процесс размораживания действует в обратном направлении. Замороженный эмбрион достают из жидкого азота. По мере размораживания из клеток постепенно удаляют криопротектор, замещая его водой. Для этого эмбрион помещают в более и более разбавленные растворы, каждый из которых содержит все меньше криопротектора. Процесс тщательно контролируется, чтобы во время размораживания клетки не были повреждены.

Затем эмбрион доводят до температуры тела и помещают в матку матери или в питательную среду в инкубаторе до имплантации. Перед помещением в матку эмбрионы проходят тщательную проверку.

Лекарства перед переносом эмбрионов

Для того чтобы увеличить шансы на успешную беременность, проводится медикаментозная подготовка к переносу криоконсервированных эмбрионов.

Для подготовки матки чаще всего используются гормональные препараты. Сперва необходимо подавить гипофиз, благодаря чему уменьшается риск возникновения нежелательной овуляции. Обычно для подавления гипофиза применяют препарат Люпрон. В большинстве случаев его назначают в виде инъекций 1 раз в день в течение 2 недель.

Затем применяют гормоны, которые дублируют изменения, возникающие в норме в матке при обычном менструальном цикле.

Для этого назначают:

• Препараты эстрогена. Они действуют на матку, способствуя утолщению и созреванию эндометрия. Длительность приема может быть разной, ее определяет врач на основании состояния слизистой оболочки матки.
• Препараты прогестерона. Назначают после достижения достаточной толщины эндометрия в матке. После начала их приема отменяют Люпрон. Прогестерон делает слизистую матки восприимчивой к имплантации эмбриона.

Если менструальные циклы у женщины регулярные, перенос эмбриона можно осуществить без гормональной подготовки.

Как происходит процесс переноса эмбрионов?

Размороженные эмбрионы переносят в полость матки с помощью тоненького катетера. Эта процедура очень похожа на взятие мазка из шейки матки. Для ее проведения не нужна анестезия.

Эмбрион помещается в небольшом количестве жидкости внутри катетера, который заводят через шейку в полость матки, достигая ее верхней части. Иногда для более точной имплантации перенос осуществляют под контролем ультразвукового исследования.

Подсадка эмбриона после криоконсервации может вызвать умеренные спазмы, очень редко развиваются кровотечение или инфекционные осложнения.

Возможный исход

Показатели успешности переноса криоконсервированных эмбрионов зависят от многих факторов, включая учреждения, в которых он проводится, возраст и состояние здоровья женщины. В среднем, успешная беременность наступает в 50-60% случаев.

Как и при любой беременности, существуют следующие риски:

• Выкидыши. Риск выкидыша в случае наступления беременности после переноса замороженного эмбриона составляет примерно 10-20%. Эти цифры не отличаются от показателей, наблюдаемых при естественном зачатии. Риск выкидыша значительно уменьшается после появления сердцебиения у плода.
• Эктопическая (внематочная) беременность. Эмбрион может не имплантироваться в нужном месте матки, переместиться в область фаллопиевых труб и стать причиной внематочной беременности.
• Многоплодная беременность. Большинство вспомогательных репродуктивных технологий характеризуются увеличением возможности многоплодной беременности, так как часто в полость матки переносят несколько эмбрионов.

Возможна ли криоконсервация больше одного раза?

Иногда, если были заморожены многие эмбрионы, размораживают несколько из них. Для переноса выбирают лучшие из эмбрионов, а другие криоконсервируют опять. Однако при использовании этих повторно замороженных эмбрионов показатели успешности снижаются.

Влияет ли это на развитие детей?

Научные данные указывают, что применение криоконсервации ооцитов и эмбрионов не увеличивает риск развития врожденных пороков и других проблем со здоровьем, по сравнению с детьми, зачатыми естественным путем.

Криоконсервация эмбрионов и ооцитов уже давно стала неотъемлемой частью методов экстракорпорального оплодотворения, которые подтвердили свою эффективность огромным количеством успешных беременностей.

Автор: Тарас Невеличук, врач,
специально для Mama66.ru

Криоконсервация эмбрионов

Криоконсервация эмбрионов – это моментальная заморозка эмбрионов посредством использования жидкого азота при температурном режиме -196 градусов по Цельсию. Замороженные эмбрионы могут храниться несколько лет, при этом жизнедеятельность их не нарушается. Эмбрионы замораживают с целью дальнейшего их использования для процедуры ЭКО. Специалисты рекомендуют проводить криоконсервацию эмбрионов при наличии рисков не успешного проведения ЭКО-процедуры, получении большого количества эмбрионов в период подготовки к ЭКО, а также при участии в программе суррогатного материнства.Решение относительно возможностей и необходимости проведения замораживания эмбрионов принимает гинеколог и эмбриолог в индивидуальном порядке для каждой пары.

Достоинства и недостатки процедуры

Криоконсервация образцов для дальнейшей пересадки обладает рядом преимуществ. Среди них возможность передать образец в качестве донорского для иных бесплодных пар, зачатие ребенка через несколько лет, после перенесенных серьезных заболеваний. Процедура предупреждает синдром гиперстимуляции яичников, экономит деньги на покупке дорогостоящих препаратов.

Кроме того, нет необходимости повторно стимулировать яичники, следовательно, снижается нагрузка на женский организм и сохраняются высокие шансы наступления беременности.

Но стоит отметить и недостаток – это вероятность потери части материалов в период проведения процедуры замораживания и размораживания. Именно по этой причине с доктором нужно обязательно согласовать риски и подготовить к замораживанию как можно больше образцов.

Алгоритм проведения процедуры

Разные центры по лечению бесплодия практикуют проведение процедуры криоконсервации на разных стадиях их развития: бластоцисты, восьмиклеточные или четырехклеточные, оплодотворенная яйцеклетка. Основное условие – это хорошее качество замораживаемого материала для увеличения процентности выживания эмбрионов после размораживания.

В самом начале материал помещают в специальную крио-протекторную среду с добавлением особых препаратов, которые будут защищать клетки от возможного повреждения в период заморозки. С помощью данных веществ предотвращается вероятность образования кристаллов льда в середине самих эмбрионов, они превращают цитоплазму клеток в гелеобразное состояние и в процессе размораживания полностью восстанавливаются их свойства.

После проведения подготовительных процедур:

• образцы размещают в специальные контейнеры – небольшие трубочки из пластика с соответствующей маркировкой;
• в каждый контейнер помещают 4-5 штук;
• готовые трубочки помещают в криобанк;
• запускается процедура охлаждения (медленное или сверхбыстрое).

Правильно замороженные образцы в криобанке хранятся столько времени, сколько нужно – от нескольких месяцев до десятков лет, но оплата за хранение вносится авансовой системой. Максимальные сроки хранения – 55 лет.

По истечении оплаченного срока хранения у пары спрашивают о дальнейшей их судьбе: утилизация, продление срока хранения, оплодотворение, использование в научных целях, разрешение на использование в качестве донорского образца для другой пары.

Для того чтобы разморозить образцы, контейнеры вынимают из жидкого азота, процесс оттаивания происходит при комнатной температуре, после перемещают эмбрионы в благоприятную среду. Помещение материала в матку проводится в период, когда образцы будут находиться в стадии бластоцисты. Перенос замороженных материалов может проводиться в естественном цикле, в стимулированном цикле или в цикле со специальной гормональной терапией.

Вид цикла определяется непосредственно доктором, учитывая состояние здоровья пациентки перед подсадкой.

Приблизительно 50 процентов пациенток после первой процедуры ЭКО могут дополнительные материалы заморозить в качестве перестраховки (на случай, если подсадка не увенчалась успехом). Процедура замораживания и хранения уже готовых эмбрионов на порядок дешевле, чем новое проведение процедуры ЭКО с самого начала.

Влияние криоконсервации на результат ЭКО и дальнейшее развитие детей

Доказано, что криоконсервация не влияет на развитие эмбриона и формирование ребенка, но повредить их можно в период оттаивания либо замораживания. Стоит отметить, что экстренная заморозка намного эффективнее, так как после нее выживаемость образцов составляет 98 процентов, а при медленном замораживании выживает порядка 50 процентов. Именно по этой причине рекомендуется уточнить в клинике метод замораживания. Результат переноса эмбриона и дальнейшая беременность зависит не только от эмбриона, но и от иных факторов: количество перенесенных эмбрионов, правильная медикаментозная поддержка, возраст женщины.

Дети, которые рождаются после ЭКО с крио-замороженными эмбрионами, ничем не отличаются от обычных детей.

Стоит понимать, что перед проведением процедуры оплодотворения полученной яйцеклетки проводятся тщательные обследования как яйцеклетки, так и сперматозоидов на момент патологий. Готовые эмбрионы тоже проверяются на наличие генетических сбоев. Следовательно, возникновение и развитие патологии у ребенка приравнивается к минимуму. Тем более при условии, что женщина полностью здорова, подсаженный эмбрион приживается, и ни беременность, ни роды, ни дальнейшее развитие ребенка не будут проблемными. Важно только обсудить, сколько одновременно будет подсажено эмбрионов, чтоб потом не приходилось одного или нескольких убирать. Есть случаи, когда из трех подсаженных приживаются все три, а не каждая семья готова к рождению сразу троих деток.

К выбору клиники нужно подходить максимально ответственно, изучать все условия, все правила, внимательно прочитать договор, и только после этого приступать к процедуре. Помните, от качества клиники в дальнейшем и будет зависеть успех беременности и здоровье вашего ребенка.